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4种毒品快速检测方法简介及其优缺点对比!

发布时间:2019-12-19 22:18:19 点击量:

《2018中国毒品形势报告》显示,2018年,中国现有吸毒人数占全国人口总数的0.18%,首次出现下降。尽管中国治理毒品滥用取得一定成效,但合成毒品滥用仍呈蔓延之势,规模依然较大,滥用毒品种类和结构发生新变化,再加上新类型毒品的不断出现,给我国禁毒工作带来巨大挑战。毒品检测在防治毒品滥用中发挥了重要作用,为吸毒者的认定、吸毒成瘾的认定、戒毒治疗过程的监测以及回归社会后的管控提供了科学依据。

根据公安部发布的《吸毒检测程序规定》,毒品检测包括现场检测、实验室检测和实验室复检。实验室检测由于存在检测周期长、设备昂贵、检测成本高等问题,不能满足禁毒工作中对现场检测的要求。目前能够满足现场快速检测要求的技术主要有酶联免疫分析技术(ELISA)和免疫层析技术(ICA)。后者包括胶体金法、时间分辨荧光免疫层析法、量子点荧光免疫层析法等。现对于市面上应用较多的酶联免疫技术、胶体金法、时间分辨荧光免疫技术以及量子点荧光面议层析技术在毒品检测应用上进行简单介绍。

一、技术简介

1、酶联免疫技术

酶联免疫吸附分析法(ELISA)是一种以通用酶作为标记物的非均相免疫分析技术。

4种毒品快速检测方法简介及其优缺点对比!(图1)

其检测原理是在保持免疫活性的基础上将抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并使用酶对抗原或抗体进行标记,并保持其抗原或抗体的免疫活性和酶的催化活性。测定时,令样本和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。通过洗涤,能够分离其他物质,保留固相载体上形成的抗原抗体复合物,最后结合在固相载体上的酶量与样本中检测对象的量具有一定的比例关系。加入酶的底物后,酶的催化作用使其转变为有色物质,通过这种有色物质的量以及颜色变化深浅就可以定性或定量样本中的待测成分。

由于酶的催化效率较高,此检测方法可以达到相对较高的灵敏度,应用于毒品及精神活性物质的检测。

毛发检测仪

2、胶体金免疫层析技术

免疫层析技术(ICA)是一种基于抗原抗体特异性免疫反应的膜检测技术,具有操作简单、快速等特点,广泛应用于临床诊断、环境监测、食品安全,毒品检测等重要领域。毒品免疫层析检测技术通常采用竞争法,该技术以固定有检测线(包被抗原)和质控线(抗抗体)的条状纤维层析材料为固定相,测试液为流动相,标记抗体固定于结合垫,通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。利用抗体抗原反应的高度特异性,通过抗体竞争结合特异性抗原(包被抗原)和样品中可能含有的被检测物(毒品)的原理。其试剂条结构如图所示。

胶体金是一种常用的免疫标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种免疫层析技术。试纸条含有被事先固定于膜上测试区的特异性合成抗原(包被抗原),结合垫上含有标记的抗特定毒品的特异性单克隆抗体;测试时,样本滴入检测孔内,样本随之在毛细效应下向上层析。如样本中的毒品浓度低于阈值或者没有待测毒品时,胶体金标记的特异性抗体不能被样本中的毒品全部结合。剩余的胶体金标记的特异性抗体在层析过程中会被固定在测试区(T)上的包被抗原结合,出现紫红色条带。如样本中的待检测毒品浓度高于临界值时,胶体金标记的特异性抗体被样本中的毒品全部结合。因而在测试区内(T)上的包被抗原没有可以结合的特异性抗体,所以不会出现紫红色条带。在质控区内(C)标记的是多克隆抗抗体,无论样本中是否存在待测药物,抗抗体都会与层析过程中的单克隆抗体结合形成紫红色条带。所以质控区内(C)所显现的紫红色条带可以判定样本是否足够,以及层析过程是否正常,同时也作为试剂的内控标准。

金标免疫层析技术快速、简便、稳定性好,有效期可长达2-3年。目前已广泛应用于病毒、细菌、毒品及各种蛋白质的检测,常见的毒品快检产品包括尿液检测卡、唾液检测卡等,检测时间只需5-10分钟,这大大促进了该方法的普及应用。

4种毒品快速检测方法简介及其优缺点对比!(图2)
4种毒品快速检测方法简介及其优缺点对比!(图3)

尿液检测卡(胶体金法) 唾液检测卡(胶体金法)

3、时间分辨免疫荧光技术

传统免胶体金技术虽然简单快速,但灵敏度较差,难以准确定量。荧光免疫层析技术作为一项新型免疫检测技术,既保留了传统胶体金试纸条的现场快速检测优点,又加入了荧光俭测技术的高灵敏度特点,成为提高免疫层析方法检测性能的主要途径之一。

时间分辨免疫荧光技术是以镧系元素标记抗原或抗体,并与时间分辨测定技术结合而建立起来的一种新型非放射性微量免疫分析技术。其技术原理为利用具有双功能基团结构的螯合剂,将镧系元素标记到抗体(或抗原)上,经免疫反应形成复合物,由于镧系元素能发出荧光,故分离除去未结合的成分后,利用时间分辨荧光仪即可测定荧光强度,从而推测待测物含量。

时间分辨免疫荧光分析技术具有灵敏度高、特异性强以及能消除常规荧光测定中的高背景等优点,广泛应用于内分泌激素检测、肿瘤科检查、毒品检测、药物检测分析等分析中。

全生物样本毒品分析仪

Super Test 3000全生物样本毒品分析仪

4、量子点免疫荧光技术

量子点(简称QDs,又称半导体纳米粒子)是由Ⅱ~Ⅵ族或Ⅲ~V族元素组成的,半径小于或接近于激光玻尔半径,能够接受激发光产生荧光的一类半导体纳米颗粒。由于其具有宽激发谱、窄发射峰、多色性及抗光漂白性等诸多优点,使其成为重要的荧光标记物用于现代均相免疫分析技术中。

4种毒品快速检测方法简介及其优缺点对比!(图4)

A,量子点结构示意图,由核、外壳以及表面有机功能层组成。

B,粒径大小不同的量子点紫外激发产生不同色彩的荧光。

C,不同组成成分的量子点发射光谱范围,波长覆盖近紫外到远红外。

量子点免疫层析技术利用量子点荧光探针做为标记物,不仅充分体现了免疫层析技术的简便,快速,特异性强的优点,而且展示了量子点的高灵敏度,以及它的荧光特性,显示出巨大的发展潜力和广阔的应用前景。但量子点在应用上也存一些问题,量子点在不同状态之间的转换会导致其出现荧光闪烁 ,因而会对单个量子点的检测结果造成影响。其次,随着量子点的逐渐激发,其荧光的强度也会慢慢变强,影响定量检测。此外,在定量检测过程中对要求发光强度的稳定性,强度的变化会影响检测结果的准确性。这些问题的有效解决可以大大推动量子点荧光免疫技术的应用。


毛发毒品痕量快速分析仪

二、不同毒品快速检测方法优缺点比较

常见毒品检材包括尿液、血液、唾液、毛发等,其中尿液、血液、唾液可反映近期的涉毒情况,毛发可反映吸毒史。在进行现场检测时,尿液、血液、唾液不需要前处理直接检测或者进行简单处理,而毛发样本在进行检测前,需进行不同方式的前处理然后选用合适的方法检测。

4种毒品快速检测方法简介及其优缺点对比!(图5)

不同的检测分析技术在毒品现场检测应用上各有优缺点。酶联免疫法操作复杂,检测时间长以及对人员专业性要求较高,不适用于毒品现场快速检测。尿液或者唾液中的毒品含量相对较高,而毛发中毒品含量比较低,对灵敏度要求较高。胶体金法由于灵敏度较低不能满足毛发的检测阈值要求,但可以筛查含有毒品浓度相对较高的尿液或唾液样本,再加上其操作简单,检测快速,检测成本低等优势,因此广泛应用于毒驾筛查、公安临检、刑侦缉毒、出入境检查的快速筛查。时间分辨免疫荧光技术和量子点荧光免疫技术特异性强,灵敏度高,能够达到公安部对于毛发检测阈值0.2ng/mg(以甲基苯丙胺为例)的要求,而且对人员要求较低,普通人员简单培训即可,因此更适合于毛发样本中毒品的现场检测。

参考文献

[1]2018年中国毒品形势报告

[2]李阳,孙杰燕.免疫分析方法在毒品检测中的应用与进展[J].科学之友,2011,6(2):6-7.

[3]韩军,李炜,李彬等,毛发中痕量毒品快速检测技术解析[J].警察技术,2019(4):82-84

[4]万红楠.免疫分析法在毒品检验鉴定中的应用及发展[J].辽宁警察学院学报,2018,2(108):65-69.